黄连中小檗碱的有效液相色谱测定法

   黄连，别名味连、川连、鸡爪连，属毛茛科、黄连属多年生草本植物，黄连喜冷凉、湿润、荫蔽，忌高温、干旱。有清热燥湿，泻火解毒之功效。其味入口极苦，有俗语云“哑巴吃黄连，有苦说不出”，即道出了其中滋味。根状茎为**中药“黄连”，含小檗碱5.56%~7.25%，黄连碱，表小檗碱，小檗红碱，掌叶防已碱，非洲防己碱，药根碱，甲基黄连碱，木兰花碱，阿魏酸，黄柏酮，黄柏内酯等，可治急性结膜炎、急性细菌性痢疾、急性肠胃炎、吐血、痈疖疮疡等症。《中国药典》中黄连的含量测定以小檗碱为质量评价依据，实验应用有效液相色谱法进行检测分析。
        一、实验仪器
LC3000有效液相色谱仪（滕州市鲁创分析仪器有限公司）由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，具备多元高压洗脱、波长扫描等功能。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
        二、样品处理

取黄连粉末（过二号筛）约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（100:1）的混合溶液50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀滤过，取续滤液待测。
        三、色谱条件（参考）：
色谱柱：Shim-pack GISS C18（4.6×250mm，5μm）
流动相：乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（45:55）（每100 mL中加十二烷基硫酸钠0.4 g，再以磷酸调节pH值4.0）
柱温：25℃                检测波长：345 nm
流速：1.0 ml/min           进样量：10 μL