中药材菊花含量的有效液相色谱法测定

   菊花，中药名，味苦、甘，性微寒。在植物分类学中是菊科、菊属的多年生宿根草本植物。菊花能入药治病，久服或饮菊花茶能令人长寿。主治风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼目昏花，疮痈肿毒。菊花的主要成分有挥发油(0.20-/0-0.85%)、腺嘌呤、胆碱、水苏碱、菊苷及黄酮类化合物。挥发油主要有龙脑、樟脑、菊酮和醋酸龙脑酷等成分，黄酮类成分有木樨草素、芹菜素、刺槐素等。此外，菊花中还含有丰富的维生素、氨基酸、微量元素等。杭白菊中维生素E含量较高。《中国药典》的收载中，以梯度洗脱-有效液相色谱法分析菊花中绿原酸（不得少于0.20%）、木犀草苷（不得少于0.080%）、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸（不得少于0.70%）的含量，作为菊花的质量评价依据。
        一、实验仪器
LC3000梯度有效液相色谱仪（滕州市鲁创分析仪器有限公司）、国产/进口液相色谱柱（以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂）、脱气机、柱温箱、自动/手动进样器、超声处理器等。
        二、样品处理：取菊花粉末（过一号筛）约0.25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率300 W，频率45 kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足损失重量，摇匀后过滤，取续滤液即得。
        三、色谱条件（参考）：

色谱柱：Inertsil ODS-3（4.6×150mm，5μm）
流动相：流动相A：乙腈；   流动相B：0.1%磷酸水溶液

                柱温：        40℃                           

                检测波长：348 nm       
                流速：        1.0 ml/min              

                进样量：     5 μL
梯度洗脱程序
时间（min）                 流动相A（%）          流动相B（%）
   0                                        10                               90
  11                                       16                               84
  50                                       16                               84