气相色谱法检测六六六、DDT农药残留

    六六六、DDT均系有机氯农药,化学性质稳定,难易降解,易通过食物链在人体蓄积,具有慢性和潜在性的毒性作用,虽然在1987年已经禁止使用此类农药,但至今仍有检出。

    有机氯类农药在我国使用长达30余年。虽然1983年停止有机氯类农药，但它们的残留问题仍不容忽视。如DDT、六六六的残留期长达50年。有机氯类农药挥发性不高，脂溶性强，化学性质稳定，易于在动植物富含脂肪的组织及谷类外壳富含脂质的部分中蓄积。由于化学性质稳定，受日光及微生物作用后分解少，在环境中降解缓慢，因此在食物中残留性强，属高残毒农药。如六六六在土壤中的半衰期为2年，而DDT为3～10年。人体长期摄入含有有机氯农药的食物后，主要造成急、慢性中毒，侵害肝、肾及神经系统，对内分泌及生殖系统也有一定损害作用。

一、原理

     试样中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有极高的灵敏度，利用这一特点，可分别测出痕量的六六六、滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。出峰 顺 序 :溶剂、α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH、pp'-DDE、pp'-DDD、op'-DDT、pp'-DDT

二、试剂

1 丙酮。

2 正己烷

3 石油醚沸程30℃-60℃ 

4 苯。

5 硫酸。

6 无水硫酸钠。

7 硫酸钠溶液(20g/L)。

8 农药标准品:六六六(α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH)纯度>99%;

滴滴涕(pp'-DDE、pp'-DDD、8.op'-DDT、pp'-DDT)纯度>99%,

9 农药标准储备液:精密称取α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH、pp'-DDE、pp'-DDD、8.op'-DDT、pp'-DDT各10 mg,溶于苯中，分别移于100 mL容量瓶中，以苯稀释至刻度，混匀，浓度为100 mg/L,贮存于冰箱中。

10 农药混合标准工作液:分别量取上述各标准储备液于同一容量瓶中，以正己烷稀释至刻度。α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH的浓度为0.005mg/L,居BHC和pp'-DDE浓度为0.01mg/L , op'-DDT浓度为0.05 mg/L, pp'-DDD浓度为0.02 mg/L, pp'-DDT浓度为0. 1 mg/L.

三、仪器设备

气相色谱仪:具电子捕获检测器

气源：氮气（99.999%）

数据处理系统（电脑、打印机、色谱工作站）

旋转蒸发器。

N一蒸发器。

匀浆机。

调速多用振荡器。

离心机

植物样本粉碎机。 

四、分析步骤

1 试样制备

谷类制成粉末，其制品制成匀浆;蔬菜、水果及其制品制成匀浆;蛋品去壳制成匀浆;肉品去皮、筋后，切成小块，制成肉糜;鲜乳混匀待用;食用油混匀待用。

2 提取步骤处理：

2.1 蛋类：称取试样20g（**到0.01g）于200ml具塞三角瓶中，，加水5 mL(视其水分含量加水，使总水量约20mL。通常鲜鸡蛋水分含量约75%，加入5ml即可)，加丙酮40mL，振荡30min，加氯化钠6g，摇匀。加石油醚30mL，再振荡30min，静置分层。取上清液35mL经无水硫酸钠脱水，于旋转蒸发器中浓缩至1ml，以石油醚定容至5ml，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5 min，于3000转离心15min。取上清液进行GC分析。

2.2植物类：称取试样匀浆20g（**到0.01g）加水5 mL(视其水分含量加水，使总水量约20mL)，加丙酮40mL，振荡30min，加氯化钠6g，摇匀。加石油醚30mL，再振荡30min，静置分层。取上清液35mL经无水硫酸钠脱水，于旋转蒸发器中浓缩至1ml，以石油醚定容至5ml，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5 min，于3000转离心15min。取上清液进行GC分析。

2.3大豆油类：称取试样1g（**到0.01g）。直接加石油醚30mL，振荡30min，静置分层。取上清液35mL经无水硫酸钠脱水，于旋转蒸发器中浓缩至1ml，以石油醚定容至5ml，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5 min，于3000转离心15min。取上清液进行GC分析。

2.4乳类：称取试样20g（**到0.01g）鲜乳不需要加水，直接加丙酮40mL，振荡30min，加氯化钠6g，摇匀。加石油醚30mL，再振荡30min静置分层。取上清液35mL经无水硫酸钠脱水，于旋转蒸发器中浓缩至1ml，以石油醚定容至5ml，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5 min，于3000转离心15min。取上清液进行GC分析。

2.5肉类：称取试样匀浆20g（**到0.01g）加水15 mL(视其水分含量加水，使总水量约20mL)，加丙酮40mL，振荡30min，加氯化钠6g，摇匀。加石油醚30mL，再振荡30min静置分层。取上清液35mL经无水硫酸钠脱水，于旋转蒸发器中浓缩至1ml，以石油醚定容至5ml，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5 min，于3000转离心15min。取上清液进行GC分析。

五、气相色谱仪分析条件：

色谱柱：农残II号（30*0.32*1.0）

柱温230℃

汽化温度280℃

ECD检测器300℃

载气：高纯氮99.999%

柱前压：0.5Mpa

尾吹：25ml/min